动物实验 (Animal Experiment)指在实验室内,为了获得有关生物学、医学等方面的新知识或解决具体问题而使用动物 进行的科学研究。动物实验必须由经过培训的、具备研究学位或专业技术能力的人员进行或在其指导下进行。下面是小编带来的有关动物实验心得,希望大家喜欢
肺水肿是指由于某种原因引起肺内组织液的生成和回流平衡失调,使大量组织液在很短时间内不能被肺淋巴和肺静脉系统吸收,从肺毛细血管内外渗,积聚在肺泡、肺间质和细小支气管内,从而造成肺通气与换气功能严重障碍。在临床上表现为极度的呼吸困难,端坐呼吸,发绀,大汗淋漓,阵发性咳嗽伴大量白色或粉红色泡沫痰,双肺布满对称性湿啰音。肺水肿为内科危急重症,临床症状凶险,病情发展急剧,易并发呼吸、循环衰竭,病死率极高,如果不及时诊治,会引发严重的后果。目前,国内外复制实验性肺水肿的模型很多,如油酸诱导,注射生理盐水,吸入光气等方法,都有很明显的现象。我们采用切断迷走神经的方法,对大鼠肺系数等指标进行观察,观察肺水肿模型是否建立。
1 材料与方法
1.1 实验动物:SD大鼠24只,体重做任何处理;B组为实验组,将大鼠称重麻
200-290g,雌雄随意,由成都医学院实醉(用3.6%水合氯酸麻醉,按100g/1mL的验动物中心提供。 量)后,找出一侧迷走神经,用手术剪剪断; 1.2 实验药品与试剂:3.6%水合氯酸。 C组也为实验组,将大鼠称重麻醉(用3.6%1.3 实验仪器与器械:电子天平,注射器,水合氯酸麻醉,按100g/1mL的量)后,找烧杯,手术器械(解剖刀,解剖盘,解剖出两侧的迷走神经剪断。手术处理后,观察剪刀,手术线 眼科镊等)、滤纸,计时器大鼠有无呼吸频率改变、湿啰音、咳血、身等。 体抽搐等体征变化,0.5小时后处死所有大2 方法 鼠。在解剖时,先结扎气管以免液体外溢,将实验动物随机分为3个组,A组B组C 然后将肺和心脏一同取出, 剪去心脏和表面组各8只大鼠。A组为假手术组,将大鼠称的脂肪组织,并用滤纸吸干表面的液体,最重,麻醉(用3.6%水合氯酸麻醉,按后分别将各组大鼠肺称重,计算肺系数(肺100g/1mL的量)后,仅找出迷走神经,不 系数=肺重量(g)/大鼠体重(kg))。
3 实验结果现象
在整个实验中,B组C组中各有一只大鼠在剪断迷走神经时不慎将颈总动脉剪断,导致大出血死亡,A组B组C组都没有出现湿啰音,也无咳嗽,鼻孔与口腔无粉红色泡沫样液体出现,也没有抽搐,整个试验期间大鼠都没有死亡。根据实验结果现象分析,并没有出现肺水肿。 4结论与讨论
肺水肿是临床较为常见的综合病症,有很多的致病因素。由于对其发病机尚未完全阐明,因此,常常借助于一些动物模型进行发病机制和相关治疗的试验研究。结扎迷走神经是急性肺水肿动物模型是常用的一种动物模型。迷走神经支配呼吸、消化两个系统的绝大部分器官以及心脏的感觉、运动以及腺体的分泌。因此,迷走神经损伤可引起循环、消化和呼吸系统功能失调。在这次试验中,结扎迷走神经一段时间后,即可观察到B、C与A组对照出现的显著性差异,首先为大鼠的呼吸急促、紫绀;试验中观察到A组大鼠双肺呼吸音清晰,试验B、C两组大鼠双肺呼吸急促浑浊,并且有少许的红色粘液出现在鼻孔,显示试验组发生肺水肿,肺泡弥散功能严重降低;试验后解剖各组大鼠,对照组双肺饱满,呈粉红色,表面光滑,未见淤血,肺切面未见溢出粉红色液体。试验组肺体积明显增大、被膜光亮、湿润,表面呈现红褐色或暗紫色,可见片状淤血出血斑。目前,国内大量研究表面,肺重系数是一个衡量肺水肿比较好且准确的指标。
大鼠经过结扎迷走神经可以在短时间内诱导肺水肿的发生,并且通过检测几项指标都可以观察到明显的变化,效果较好。夹闭迷走神经来诱导大鼠肺水肿动物模型简单易操作实施,成本小,重复性高,可以作为临床上比较理想的肺水肿动物模型
杂谈 实验动物学就这样匆匆结束了,总觉得时间过得很快,心里有种说不出的不舍.记得最初选修这门课的时候,心里很是没低,因为以前从来没有接触过动物实验,(由于专业的原因吧)虽然很想学,可又担心会跟不上其他同学,甚至会考试不过影响学位.不过最后还是选了,如果不学也许就永远不知道它其中所蕴含的乐趣和那种追求医学研究时所必须的严谨,现在想想当时的选择是多么的正确,,正是因为这次犹豫中的选择,让我爱上了这门课.记得第一次实验课是让学捕捉实验鼠,并做常用的给药方式,第一次抓到老鼠时的兴奋至今还难忘,这个实验还算简单,所以很顺利就做完了老师所要求的,同时也给了我很大的信心去学好这门课.以后每次试验课我都会早早的去,很用心的去记录老师讲的每个实验细节,直至最后一节课.有时候看到那些可爱的实验动物总不忍心去实施残忍,每当看到因为自己操作失误而致动物大出血,最后挣扎到死亡时,心中都有种莫名的难受.也有同学对我说既然选择去做实验就不能有怜悯,手要狠,我知道她说的是对的,可是我需要去慢慢的适应.后来我就笑着对同学说,如果不能避免残忍,那就让我们认真的去做好每个实验,合理的去利用每一个实验动物,在不影响实验结果的前提下最好一鼠多用,虽然最终都是要处死的,但至少死有所值吧.
随着对医学研究的不断深入,动物实验在医学、药学中的应用也会越来越广,它的重要性将会被更加重视.医学的发展历史告诉我们:有些问题单凭临床经验积累需要花费很长时间才能得到解决,或者虽花费很长时间,问题仍得不到解决,而通过动物实验有些问题就可以得到迅速解决.在我们追逐科研成果的同时,也一定不要忘记去适时的保护这些为我们做出了巨大贡献的动物,如果说,实验是为了更长远的社会利益,那几乎所有的医学科研成果是以无数动物的生命作为代价的,所以请让我们用仁慈的心去善待那些有生命的动物们吧.
通过学习这门课,最大的收获我觉得并不是学会了多少种实验的操作(当然这是最基本的要求),而是通过实验更让我们受益的是它需要的这种执着,细心和认真严谨的态度,还有那种团队合作的精神.任何一个实验都是需要大家共同努力去完成,任何一个细节出了问题都会导致最终的失败,所以就要求我们去负责的对待每个环节,每一个步骤.只要把握好整个过程,就会顺利的达到预期的目的.
最后,更要感谢的就是这么多天来一直陪伴我们,不厌其烦、耐心教诲的所有实验室老师们,是你们不仅让我们学会了基本的实验操作,激起了我们对实验课的兴趣,更主要的是从你们身上让我们看到了对那种学术热爱、严谨的精神和为人师表的优秀风范,也许我们以后就不需要再做实验,也许这真的就是我们研究生生涯的最后实验课,但你们的精神和教诲会影响我们的一生,衷心的谢谢您:最亲爱的老师.
我们实验都是拿裸鼠做的,预实验是我扎了一只,打了4-5 针一针都没进,后来让我们科的一个护士来扎都扎不进去!并且让人倍感压力的是实验组和对照组要对比,所以要求打进的肿瘤细胞量得一致!小老板很严格,要是打不好自己准挨说呢!
裸鼠很贵,练习的空间很小!后来无意中我们动物房的其他实验组要处理实验完成的老鼠,我就求了求让他们,让他们把裸鼠先别处死,我帮他忙养着,然后我可以拿来练习了。后来经过了自己的摸索和联系,现在尾静脉一次注射成功的概率在80%以上呢。现把经验总结如下:
2、把老鼠装到刚才那个装置里,在尾巴静脉注射前先要拿50℃左右的水泡一泡,1分钟,切忌用很热的水,会把尾巴烫脱皮然后感染呢。泡完后会看到尾静脉明显的充盈起来了(此步骤十分的重要)。
3、然后就该注射了,我一开始做的时候是找一个平面,就是能让尾静脉平行的面,可以东西踮起来或者用手垫着把尾静脉拉成一个平面!总的原则就是把尾静脉拉平、拉紧了。
来美国加州已经整整1个月,昨天才刚刚办好学校的身份卡,终于可以正式接受动物实验培训了。今天上午,本来是一个来自印度的博士负责培训,但后来她需要去上课,临时换成一个华裔博士(他不会说中文,我只听他说过“剪头发”三个字),这个陈博士很有一些侠客风骨,什么事情都比较主动帮助。他告诉我,最近几天的时间他都可以给我支配,让我十分感动。本文也作为来美1月的体会小结吧。
我要学习的具体内容是如何神经外手术后脑损伤动物模型,就是把老鼠的大脑大概1/6的部位切除。这个实验最重要的是保持手术过程的一致,由于手术容易脑出血,因此手术操作尽量轻柔。
今天上午9点前我早早来到实验室,等到10点后,陈博士过来来说现在就可以开始,我说很遗憾,12点我必须离开,因为我女儿的入学体检安排在1点,第一次做实验怕干不完,言外之意是等明天再说吧。他说没关系,干到什么程度你随时可以离开,我心里说那多么不好意思,如果试验进行到一半,后续的整理要老师来负责。不过我也希望能早点开工,于是就接受了。毕竟开始的有些突然,我本来是准备在他指导下自己来做全部的工作,结果大部分事情都是他帮忙,包括把动物从动物房拿到实验室,准备手术器械,准备手术显微镜等。整个实验中,所有的准备工作几乎都是陈博士代劳,我只做了最核心的工作,我想起在国内读博士的时候,许多技术活都是从打下手,当学徒开始的。
由于第一次做这个实验,动作比较缓慢,到12点才终于把脑子切掉,后面的缝合,以及动物护理等都没有时间做了,这些内容都留给陈博士了。
开始前,陈博士问我为什么要用这个模型,你过去不是做脑出血的模型吗?我说主要是觉得这个损伤是属于计划性损伤,比较符合临床实际,很适合开展预适应方面的研究。另外我觉得在中国目前使用的比较少,我也希望能把这个模型引进到中国。他听后非常高兴,认为我的观点是非常好的,他也这么认为。
结合最近见习的训练的情况,我觉得这里关于动物实验方面值得学习的内容有许多。这里暂时只讲几点体会。
一是对动物的管理非常严格。动物房的条件非常好,比实验室的卫生条件还要好,居住空间有明确的规定,一只大笼子内只能有2只大鼠。进入动物房必须登记,拿走几只动物,动物的编号和实验目的要详细记录。
二是实验步骤的记录非常详细。到具体实验过程,详细的记录更能体现。每只动物都有一个档案,编号,体重,麻醉时间,手术时间,每一个具体的操作步骤都有详细的记录。动物模型做好后,经过适当恢复,送回动物房,仍需要登记。当处死动物前,每个都需要进行行为学的记录,进行动物一般情况的观察和记录。然后处死动物,处死动物必须采用安乐死。动物处死后取出大脑要进行照相记录,然后根据实验目的对脑组织进行后续的处理。总之,在关于动物实验的整个过程都有非常详细的记录。如果那个动物有可能出现异常结果,可以回头寻找原因。过去有许多老师在进行研究生培养的督导时,经常建议能作好原始记录,但都是强调记录本如何规范,对内容和细节并不关心,实际上记录本的方式并不是理想的记录方式。原始记录不一定都要在一个本子上体现。
三是协作精神。我来这里一个月,听到最多的问题是,你要做什么研究,我们是否可以谈谈,实际上大家都非常相互关心别人的研究内容,随时开展相互讨论,相互请教的事情也随时可见,也有许多人出来结果过来请教如何解释。我的研究内容涉及到几个基本的内容,其中一个是动物模型,因为过去没有做过需要从头学习,结果本组内至少有一大半人都积极要求指导。即使那些不主动的,去看他们实验也是随时停下来让我看,并耐心给我解释注意细节。总的感觉是他们都希望把自己所有经验,所有技巧都不作任何保留传授给你。另外一个研究内容是动物行为学检测,这个因为需要其他人协助双盲对照,结果早就有人预约说可以帮助解决。总之,在这里大家的相互协作精神非常的普遍。你不会看到有人怕别人学走你的思想,怕别人掌握了你独门绝技。
天就要进行动物学实习的展示了,好紧张,会不会抽到我答题呢?很有可能,看来不能随便乱抱佛脚,我会努力准备,不会让组里成员失望的,当然,前提是抽到我啦~~
为期5天的动物学实习,在端午节那天结束了。由于有了植物学实习的经验,我们对动物学实习的痛苦早已做好了心理准备。植物学实习的时候,我们是集体行动。所有人都围着老师和植物转。而动物学实习,我们的自主性极大。整个动物学实习下来,我觉得最重要的是“眼明手快”。那些瓢虫、蛾、蜂等等都隐藏在密密麻麻的树叶或草丛中,需要仔细地观察才能发现。而在帽峰山最难捕捉的就是大大的凤蝶了。它们“身手敏捷”,每次从深谷飞出,都引起一片惊呼,但我们尝试了无数次,最终还是没有抓住!很失望!但是,在火炉山,由于地势较为平坦,峡谷不深,加上有了帽峰山捕蝶的经验,我们这次很顺利地捕捉到了很多种类的蝴蝶。
可能是由于小时候,经常在山里玩耍,去摘野果,捉蝉,掏鸟窝之类的,我一点也不害怕那些动物,反而觉得很有趣。当然,我们抓动物不是随便乱来的。设想过我们要抓哪一类动物,我们初步了解了它们的习性,然后开始寻找目的地。在火炉山,我就在水边的小石头下,抓到一条很大的马陆,还有在浅水处抓到一只小蟹,很开心!上山不久,我还抓到一只正在蜕皮的蝉!那个蝉壳已经从背中线裂开,可以看到幼蝉绿色的背部!等到11点半休息的时候,居然发现蝉已经完全从壳里钻出来了!绿绿的!整个过程也就不到一个小时!可惜抓到它时,卡氏液不在我们这个小组(因为我们这个大组分成两个小组来行动了)。不然可以把它固定在壳里。也很可惜,那天没能向老师说明我观察到的这个现象。
在大学城,我在湖边抓了一只有绿色条纹的蜻蜓。这种蜻蜓很难抓!它总是在湖边忽悠一下就飞走。我觉得自己有点邪恶啊!因为我是趁它产卵的时候,用捕虫网抓住它的。在野外实习的过程中,我们还看到了蜻蜓交尾和蝴蝶交尾的现象。学习了动物学之后,我们不再以玩乐的眼光来观察动物,而是从专业的角度来观察思考,也发现了一些动物世界中有趣的事情,而不仅仅是看大盘表面现象。
在整个实习过程中,我们小组分工合作,大组的联系就不够紧密。实习路上,我们打趣说我们这是西天取经呢!
制作标本的时候,我们一起查阅资料,为确定每一只虫子的目而纠结;制作标本的时候,为蚂蚁的微小而叹息。制作标本的过程,我们不断翻书查阅,使我们的知识得到一个梳理和巩固。
我觉得,这次动物学实习又一次增进了小组成员之间的感情,增强了同学们之间的了解,为我们的大学生活增加了更多有趣的故事。同时,也学习到了很多知识。最后,老师人性化地取消了个人考试,让我们很感动!
三天的到外实习,很累很辛苦但真的很快乐~~~想想就够乐的咯,这辈子也就这次动物学实习了,真的没有什么机会可以以这副武装到广州的帽峰山、火炉山和大学城横行啊!哈哈,想到别人的眼光我们虽然一开始也挺尴尬的,可是后来,大家都觉得自己开心就好,何必在乎其他人的眼光。爬山爬到累的腿都直抖了~~~火炉山的阶级太恐怖了~~哪有那么陡的~~顺便崇拜一下那些每天登山的人~~最近肯定提到爬山,肯定不去了。我们组的合作良好,昆虫捉到很多,蝴蝶扑到了很多,大家都是捕蝶大户了。希望明天的展示顺利进行,老师有问我们必答!!加油啦加油啦